Диагностические тесты на сифилис. Диагностика сифилиса – современные методы микробиологических и серологических исследований. Кресты, прочерки и плюсы в расшифровке анализа: как понимать

Реагиновые тесты используются для массового обследования пациентов на сифилис. Их обычно проводят в рамках профилактических осмотров. Такие тесты доступны в каждом лечебном учреждении и проводятся быстро. Ответ обычно готов спустя 30-40 минут.

Положительный результат при проведении реагиновых реакций не является критерием для постановки диагноза. Необходимо дополнительно провести видоспецифические исследования.

Самым распространенным скрининговым методом является реакция Вассермана. При ее проведении используются кардиолипиновый и трепонемный антигены. Если в сыворотке крови нет реагинов, то произойдет гемолиз эритроцитов барана, которые добавляются в качестве индикатора.

При наличии реагинов цельные эритроциты выпадут в осадок, в этом случае реакция считается положительной.

Реагиновые в следующих случаях:

• другие заболевания, возбудители которых по антигенной структуре схожи с бледной спирохетой
• беременность
• онкологические заболевания
• прием салицилатов
• инфаркт миокарда
• технические ошибки при проведении анализа

При положительном результате реагиновой реакции проводятся специфические серологические тесты. Также их назначает, если отрицательный результат вызывает сомнения.

Трепонемные антигены используются в таких анализах, как РИФ, РИТ, ИФА, РПГА, реакция гемадсорбции в твердой фазе. Эти реакции основаны на образовании комплексов антиген-антитело и различаются методикой их определения. Чаще всего используется реакция иммунофлюоресценции.

Препарат обрабатывается люминесцирующей сывороткой, что позволяет определить иммунные комплексы под люминесцентным микроскопом.

Одной из самых чувствительных серологических реакций, позволяющих диагностировать сифилис, является РПГА. Метод обладает высокой точностью. Его часто используется для верификации диагноза при беременности, когда другие анализы могут давать ложноположительный результат.

Особенности серодиагностики

Для проведения серологической диагностики сифилиса в разных его периодах производят забор крови из вены. Анализ рекомендуется проводить натощак, это снижает количество ложноположительных результатов. Пробирка должна быть стерильной. При проведении экспресс тестов в ряде случаев берут кровь из пальца.

При подозрении на для серодиагностики берут спинномозговую жидкость. Для ее анализа используются те же методики, что и при исследовании крови.

Для диагностики сифилиса пройдите полное обследование в нашей клинике.

1. Потекаев Н.Н., Фриго Н.В., Алмазова А.А., Лебедева Г.А. Эпидемиология сифилиса в современных условиях. Клиническая дерматология и венерология . 2015;1:22-34.
2. Larsen SA, Steiner BM, Rudolph AH. Laboratory Diagnosis and Interpretation of Tests for Syphilis. Clin Microbiol Rev 1995 Jan;1-21.
3. Coles AC. Spirochaeta pallida. Methods of examination and detection, especially by means of the dark-ground illumination. Br Med 1909;1:1117-1120.
4. Kellogg, DSJr, Mothershed SM. Immunofluorescent detection of Treponema pallidum : a review. JAMA 1969;107:938-941.
5. Mullis KB. Specific synthesis of DNA in vitro via a polymerase catalysed chain reaction. Meth Enzymol . 1987;155:335.
6. Centurion-Lara A. Detection of Treponema pallidum by a sensitive reverse transcriptase PCR. J Clin Microbiol . 1997;35;6:1348-1352.
7. Wassermann A, Neisser A, Brück C. Eine serodiagnostische Reaktion bei Syphilis. Dtsch Med Wochenschr . 1906;32:745-746.
8. Pangborn MC. Cardiolipin and its application in a chemically purified antigen for the serodiagnosis of syphilis. Proc N Y State Assoc Public Health Lab . 1946;26(1):26-29.
9. Pangborn MC. A study of the composition of cardiolipin. Fed Proc . 1946;5(1 Pt 2):149.
10. Дмитриев Г.А., Брагина Е.Е. Современные методы лабораторной диагностики сифилиса. Часть I. Вестник дерматологии. 1996;2:29-33.
11. Дмитриев Г.А., Брагина Е.Е. Современные методы лабораторной диагностики сифилиса. Часть II. Вестник дерматологии. 1996;3:33-38.
12. Неспецифические положительные результаты серологических реакций на сифилис. Количественные модификации современных серологических реакций . Методические рекомендации. М. 1990.
13. Приказ МЗ №87 РФ от 26 марта 2001 г. «О совершенствовании серологической диагностики сифилиса».
14. Российское общество дерматовенерологов. Федеральные клинические рекомендации по ведению больных сифилисом. М. 2013.
15. Ляхов В.Ф., Борисенко К.К., Потекаев Н.С., и др. Динамика трепонемоспецифической иммуноглобулинемии при ранних формах сифилиса. Вестник дерматологии. 1990;8:38-42.
16. Киселева Г.А., Ткачев В.К., Беднова В.Н., и др. Сравнительное из­учение чувствительности и специфичности трех иммуноферментных тест-систем, предназначенных для выявления иммуноглобулинов класса М к возбудителю сифилиса. Вестник дерматологии. 2000;4:6-10.
17. Эрматова Ф.А. Определение специфических иммуноглобулинов класса М для ранней диагностики сифилиса (клинико-лабораторное исследование): Дис. … канд. мед. наук. М. 2014.
18. Марданлы С.Г., Арсеньева В.А., Анискова И.Н., Жигаленко А.Р. Оте­чественная тест-система «Лайн-Блот Сифилис-IgM» для определения IgM-антител к Treponema pallidum методом линейного иммуноблоттинга Клиническая дерматология и венерология. 2013;5:35-38.
19. Гусева С.Н. Использование теста IgM-РИФабс в обследовании беременных на активность сифилитической инфекции. Российкий журнал кожных и венерических болезней. 2004;6:60-63.
20. Овчинников Н.М., Беднова В.Н., Делекторский В.В. Лабораторная диагностика заболеваний, передающихся половым путем . М. 1987.
21. Lee K, Park H, Roh EY, Shin S, Park KU, Park MH, Song EY. Characterization of sera with discordant results from reverse sequence screening for syphilis. Biomed Res Int . 2013;2013:269-347.
22. Binnicker MJ. Which algorithm should be used to screen for syphilis? Curr Opin Infect Dis . 2012 Feb;25(1):79-85.
23. Castro A, Jost H, Cox D, Fakile Y, Kikkert S, Tun Y, Zaidi A, Park M. A comparison of the analytical level of agreement of nine treponemal assays for syphilis and possible implications for screening algorithm. BMJ Open . 2013 Sep 19;3(9).
24. Park IU, Chow JM, Bolan G, Stanley M, Shieh J, Schapiro JM. Screening for syphilis with the treponemal immunoassay: analysis of discordant serology results and implications for clinical management. J Infect Dis . 2011 Nov;204(9):1297-1304.

Непрямые методы диагностики сифилиса.

Для диагностики сифилиса применяется множество методов исследования, различающихся по технике проведения и предназначению. Прямые методы направлены на обнаружение возбудителя в исследуемом материале с помощью микроскопии (микроскопия в темном поле и др.) или ПЦР.

Помимо методов прямой детекции бледной трепонемы (T. pallidum), при обследовании на сифилис широкое применение получили непрямые (серологические ) методы исследования, выявляющие антитела к возбудителю сифилиса в сыворотке крови и цереброспинальной жидкости. К непрямым методам диагностики сифилиса относятся серологические реакции ИФА, РПГА, КСР, РИФ и РИФ-абс, РИБТ, ПЦР, экспресс-метод, иммуноблот и другие.

Серологические методы диагностики инфекционных заболеваний.

Серологические критерии диагностики основаны на специфических реакциях "антиген-антитело". Реагируют антигены (компоненты клеточных стенок, жгутиков, капсул, ДНК и токсинов) тех микроорганизмов, которые необходимо определить, с антителами , содержащимися в сыворотках. Между антигенами и соответствующими им антителами происходит связывание, что и положено в основу методов серологической диагностики. Серологические реакции применяются для определения неизвестного антигена (источником которого является бактерия, вирус, токсин и др.) с помощью известного антитела или для определения антитела в сыворотке с помощью известного антигена.

Серологические реакции классифицируют в зависимости от состояния антигена и особенностей среды, в которой взаимодействуют антиген и антитело, а также по способу проведения.

Для проведения серологических реакций испольуют множество лабораторных методов, таких, как агглютинация, преципитация, связывание комплемента, иммунофлуоресценция, иммуноферментный и радиоиммунный анализ и другие. Эти реакции позволяют эффективно проводить предварительную идентификацию микроорганизмов.

Сыворотки, которые необходимы для постановки серологических реакций, получают экспериментальным путем, в частности, их производят институты вакцин и сывороток, и предлагают в составе коммерческих диагностических наборов.

Серологические методы являются важным инструментом в диагностике и лечении инфекционных заболеваний человека и животных, поскольку с их помощью можно не только идентифицировать возбудителя заболевания, но и обнаружить в крови больных и переболевших специфические антитела к соответствующим возбудителям. Серологические методы в настоящее время являются самыми эффективными методами диагностики при невозможности или трудностях выделения возбудителя, и сравнительно редко дают ложноположительные и ложноотрицательные результаты.

Использование серологических методов для диагностики сифилиса

В основе серологических лабораторных методов диагностики сифилиса лежит способность организма давать иммунный ответ на появление возбудителя. С помощью серологических реакций в сыворотке (плазме) крови (или цереброспинальной жидкости) выявляют следы иммунного ответа на заражение, а именно антитела к антигенам бледной трепонемы, или же сами антигены.

Для того, чтобы установить специфический характер имеющихся клинических проявлений (т.е. что они являются следствием именно сифилиса) и, в дальнейшем, контролировать динамику патологического процесса, предложено большое количество серологических методов исследований. Эти же методы также широко применяют для скрининга населения.

В соответствии с действующими национальными руководствами и клиническими методическими рекомендациями, во многих странах мира при обследованиях населения с целью выявления больных сифилисом и при установлении клинического диагноза используются передовые серологические методы. Их применяют как при наличии клинических признаков болезни у пациентов, так и в латентные периоды.

Постановка серологических реакций - один из наиболее надежных методов диагностики сифилиса. Стандартизованные серологические реакции с регламентированной методикой постановки называются серологическими тестами на сифилис. Учитывая то, что почти все серологические реакции на сифилис в определенных условиях могут быть ложноположительными или ложноотрицательными , их следует ставить в комплексе и, при необходимости, в динамике.

Серологические реакции, которые используются для определения антител в сыворотке крови больного, отличаются друг от друга чувствительностью, специфичностью, сложностью постановки и стоимостью. Помимо классических методов, для эффективной серодиагностики сифилиса используются иммунологические тесты и технологии, получившие в 21 веке новый импульс к развитию.

Антитела выявляются различными иммунохимическими (серологическими) методами, среди которых осадочные реакции, иммуноферментный, иммунохемилюминесцентный, иммунохроматографический анализы, линейный иммуноблоттинг, исследование с применением проточной флюорометрии, технология иммуночипов и другие.

Серодиагностика (исследование с помощью серологических методов) применяется для:

• подтверждения клинического диагноза сифилиса,
• постановки диагноза скрытого сифилиса,
• контроля за эффективностью лечения, как один из критериев излеченности больных сифилисом,
• профилактики сифилиса (скрининговое обследование определенных групп населения с целью выявления патологии).

Важнейшие свойства, необходимые серологическим тестам - чувствительность, специфичность, воспроизводимость

Решающим критерием при выборе метода лабораторной диагностики является его эффективность - чувствительность, специфичность и воспроизводимость.

Чувствительность - это доля положительных результатов у больных. Чувствительность метода определяется процентом положительных результатов исследования проб, заведомо содержащих специфические маркеры возбудителя (нпр., антигены возбудителя или антитела к ним).

Специфичность - доля отрицательных результатов теста у здоровых пациентов. Специфичность метода определяется процентом отрицательных результатов исследования проб, заведомо не содержащих специфические маркеры возбудителя. Таким образом, чем выше чувствительность и специфичность, тем надежнее и достовернее метод исследования.

К важным диагностическим критериям также относится воспроизводимость результатов при повторных исследованиях одних и тех же проб. Следует отметить, что, несмотря на значительные достижения в области высоких технологий, не существует методов, обеспечивающих 100% (абсолютную) чувствительность и специфичность во всех исследуемых биопробах.

В настоящее время в России официально регистрируются тест-системы, наборы, ингредиенты, обладающие при постановке реакции менее 95% чувствительностью и специфичностью. Таким образом, всегда существует возможность получения неадекватного результата.

Классификация тестов по типу применяемого антигена. Трепонемные и нетрепонемные тесты на сифилис

В современной венерологии для диагностических целей используется более десятка вариантов серологических реакций на сифилис, которые можно подразделить по разным критериям на различные категории. Классификацию проводят по методологии проведения исследований, области применения, скорости, дешевизне, требованиям к лабораторной оснащенности и т.д.

Трепонемные реакции теоретически более специфичны, однако они также дают ложноположительные результаты. Более того, они не позволяют дифференцировать нелеченный и излеченный сифилис. Результаты трепонемных реакций будут положительными в обоих случаях. Нетрепонемные реакции позволяют различать нелеченную или недавно перенесенную и излеченную инфекцию.

При обследовании рекомендуется проводить и трепонемную, и нетрепонемную реакции. Для установки и подтверждения диагноза "сифилис" требуются положительные результаты при проведении тестов обоих типов - трепонемных и нетрепонемных. Поэтому нетрепонемные тесты применяются в комбинации с трепонемными тестами, и проводятся до начала, в процессе и после окончания лечения в определенные временные интервалы.

1. Нетрепонемные тесты

Наиболее известные из нетрепонемных тестов с визуальной расшифровкой результатов - это

• RW - реакция Вассермана с липидными антигенами (реакция связывания комплемента с кардиолипиновым антигеном, РСКк)
• реакция Канна (не используется в настоящее время),
• цитохолевая реакция Закс-Витебского (не используется в настоящее время),
• микрореакция преципитации с плазмой или инактивированной сывороткой (МРП или РМП),
• RPR (тест быстрых плазменных реагинов, Rapid Plasma reagin),
• TRUST (тест с толуидиновым красным и непрогретой сывороткой, Toluidin Red Unheated Serum Test).

Среди нетрепонемных тестов имеются 2 теста с микроскопическим считыванием результатов реакции:

1. VDRL - (Venereal Disease Research Laboratory);

2. USR - тест определения активных реагинов плазмы (Unheated Serum Reagins).

Реактивность в нетрепонемных тестах обычно указывает на повреждение тканей и не всегда специфична в отношении сифилиса. Простота выполнения и низкая стоимость позволяет использовать их как отборочные реакции при установлении предварительного диагноза сифилиса.

2. Трепонемные тесты

В трепонемных тестах используются специфические антигены трепонем. Эти тесты обязательны для подтверждения диагноза (РПГА, РИТ, РИФ и ИФА). Они являются более сложными и дорогостоящими, чем тесты 1-й группы, но и более специфичными и чувствительными. Выявление антител в спинно-мозговой жидкости также производится с помощью трепонемных тестов.

Традиционные трепонемные реакции, подтверждающие диагноз сифилиса, требуют дорогого лабораторного оборудования и опытного персонала, поэтому они редко проводятся вне специализированных лабораторий. Однако сейчас их можно заменить простыми и быстрыми трепонемными реакциями, которые возможно проводить на местах и в которых используется цельная кровь. Проведение этих реакций не требует длительного обучения, специальных условий для хранения реактивов и оборудования.

Сравнительная дешевизна, удобство и практичность трепонемных экспресс- реакций привлекают к ним внимание не только как к методам подтверждения диагноза. Эти реакции могут применяться для скрининга сифилиса в рамках оказания первичной медицинской помощи (их можно проводить на местах, в том же лечебно-профилактическом учреждении) или в районах, где лаборатории не доступны. Однако поскольку антитела к T. pallidum определяются на протяжении ряда лет независимо от того, лечился больной или нет, трепонемные экспресс-реакции нельзя использовать для оценки эффективности лечения и дифференциальной диагностики нелеченного и излеченного сифилиса.

Классификация серологических методов диагностики сифилиса по типу определяемых антител

В современной дерматовенерологии для диагностики используются различные серологические реакции на сифилис. Часть методов, которые были актуальны ещё десять лет назад, перестают применяться из-за сложности или недостаточной специфичности. В зависимости от выявляемых антител, методы серологической диагностики сифилиса подразделяются на три группы:

I. Липидные (реагиновые) реакции - определяются антитела к липидным антигенам (реагинам):

1) флокуляционные: микрореакция на стекле с липидными антигенами -экспресс-метод диагностики (микрореакции преципитации - МРП), VDRL, CMF (cardiolipin microflocculation test), RPR и др.;

2) реакция связывания комплемента (РСК) с липидными антигенами: реакция Вассермана (РВ), качественная и количественная методика постановки, термостатная и на холоде (реакция Колмера);

3) осадочные реакции, которые в настоящее время не используются: реакция преципитации Кана, цитохолевая реакция Закса - Витебского и др.;

II. Групповые трепонемные реакции - определяются антитела к групповым трепонемным антигенам (входящим в состав микробной клетки как патогенных, так и сапрофитных трепонем):

1) РСК с протеиновым антигеном Рейтера;

2) реакция иммунофлюоресценции (РИФ);

3) реакция иммунного прилипания (РИП).

III. Видоспецифичные протеиновые трепонемные реакции - определяются антитела к специфическим видовым антигенам Treponema pallidum:

1) реакция иммобилизации бледных трепонем (РИТ);

2) реакция иммунофлюоресценции РИФ-абс и ее варианты (IgM-FTA-ABS, 19S-IgM-FTA-ABS, и др.);

3) реакция непрямой гемагглютинации бледных трепонем (РПГА) и её модификация TPPA.

4) иммуноферментный анализ (ИФА);

5) иммуноблотинг.

Практическое использование серологических реакций на сифилис

Различные серологические реакции используются для разных практических целей.

За рубежом при массовых обследованиях населения и при необходимости экстренного выявления сифилиса используются нетрепонемные отборочные реакции (VDRL, RPR и др.). Для постановки диагноза требуется подтверждение в трепонемных тестах РИФ-Абс (FTA-ABS), РПГА или TPPA. В настоящее время, рекомендуется использовать ИФА, как замену VDRL в скрининговых тестах. Это связано с тем, что тест ИФА отличается чувствительностью, специфичностью, возможностью автоматизировать исследования, а также с разработкой диагностических тест-наборов. Кроме того, обосновывается реверсивная схема порядка исследования на сифилис, когда первыми используются трепонемные тесты.

С целью контроля за эффективностью терапии и для оценки активности инфекции рекомендуют VDRL в количественном исполнении. В качестве подтвердающего/дополнительного теста используется тест ИФА на противотрепонемные антитела IgM.

В отечественной практике используют комплекс серологических реакций (КСР), включающий реакцию микропреципитации (РМП) с кардиолипиновым антигеном и РСК с кардиолипиновым и трепонемным антигенами. В последнее время рекомендуется в КСР заменять РСК на ИФА или РПГА. Также используются РИФ (и ее модификации - РИФ-Абс и остальные), РИБТ.

РИБТ применяют в качестве реакции экспертизы в случаях расхождения трепонемных реакций.

Подходы к лабораторной серологической диагностике сифилиса в Российской Федерации

Внедрение в практику унифицированных методов клинических лабораторных исследований в СССР и Российской Федерации позволило ввести более прогрессивные диагностические методы, упорядочить работу клинико-диагностических лабораторий, повысить производительность труда, сократить дублирование лабораторных исследований и стало основой для разработки рациональных форм готовых наборов реактивов.

В 1985 году в СССР, в целях совершенствования диагностики сифилиса, нетрепонемная реакция РСК с неспецифическим (вассермановским) антигеном и осадочные реакции (цитохолевая и Кана) были исключены из диагностического комплекса, как менее чувствительные и не дающие дополнительной информации.

Вместо них, в составе комплекса серологических реакций на сифилис (КСР), было предусмотрено применение реакции связывания комплемента с трепонемным и кардиолипиновым антигенами (РСКт) и микрореакции преципитации с кардиолипиновым антигеном (РМП). Более высокая чувствительность и информативность этого комплекса реакций обеспечивала выявление не только реагинов, но и противотрепонемных антител.

1985 год

1. РМП с кардиолипиновым антигеном с плазмой крови и инактивированной сывороткой крови. Отборочный тест в случае изолированного применения.

2. РСК с трепонемным и кардиолипидовым антигенами; качественная и количественная методики постановки, термостатная и на холоде;

3. Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИТ); пробирочная и меланжерная методики постановки;

4. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ) в следующих модификациях: РИФ с абсорбцией (РИФ-абс) с сывороткой крови и капиллярной кровью, РИФ-200, РИФ с цельной спинномозговой жидкостью (РИФ-ц); качественные и количественные методики постановки. Диагностика скрытых и поздних форм сифилиса, распознавание ЛПР (ложно-положительных результатов)

5. Комплекс классических серологических реакций (КСР): РСК (реакции Вассермана) с кардиолипиновым и трепонемным антигенами + РМП. Профилактическое обследование населения на сифилис, диагностика всех форм сифилиса, контроль эффективности лечения, обследование лиц, контактных по сифилису.

В 2001 году Минздравом РФ был утвержден новый нормативный документ, регламентирующий порядок проведения диагностических тестов - приказ Министерства Здравоохранения РФ №87 от 26 марта 2001 года «О совершенствовании серологической диагностики сифилиса» .

С целью совершенствования лабораторной диагностики сифилиса, повышения качества работы и предупреждения дальнейшего распространения заболеваемости сифилисом рекомендовано заменить РСК в комплексе серореакций (КСР) при диагностике сифилиса на ИФА и РПГА в качестве отборочных и подтверждающих тестов, т.к. эти тест-системы являются высокочувствительными, специфическими и воспроизводимыми.

Приказ №87 от 26 марта 2001 года «О совершенствовании серологической диагностики сифилиса» предусматривает применение для серо- и ликвородиагностики сифилиса в России следующих методов:

1. РМП и зарубежные аналоги (VDRL, RPR и аналогичные микрореакции) в качестве отборочных тестов при обследовании населения на сифилис. Постановка РМП осуществляется с плазмой или инактивированной сывороткой крови.
2. Иммуноферментный анализ (ИФА). Антиген из культуральных или патогенных бледных трепонем. Диагностические реакции, в том числе для ликвородиагностики. В связи с простотой постановки и наличием коммерческих тест-систем могут использоваться как отборочные тесты.
3. Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА). Антиген из культуральных или патогенных бледных трепонем. Отборочные и диагностические реакции.
4. Качественный и количественный варианты РИФ (РИФ-абс, РИФ-ц, РИФ с капиллярной кровью из пальца). Антиген - патогенная бледная трепонема штамма Никольса.
5. Комплекс серологических реакций (КСР) на сифилис, состоящий из реакции связывания комплемента (РСК) с трепонемным и кардиолипиновым антигенами, и РМП. Возможно заменить реакцию связывания комплемента на ИФА или РПГА также в сочетании с РМП. КСР относится к диагностическим тестам.
6. Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ), в которой в качестве антигена используют патогенные бледные трепонемы штамма Никольса. РИБТ относятся к диагностическим подтверждающим тестам.

Таким образом, последовательность обследования пациентов на сифилис в учреждениях здравоохранения рекомендуется планировать следующим образом:

1. При первичном обследовании производится постановка отборочной (скрининговой) реакции микропреципитации (РМП) или ее модификации (RPR, TRUST, VDRL) в количественном и качественном вариантах и в случае положительного результата - любого специфического подтверждающего трепонемного теста (РПГА, ИФА, КСР, РИФ, РИТ);

2. После окончания терапии ставится РМП или ее модификация и по снижению титра судят о динамике инфекционного процесса и эффективности терапии. Подтверждением эффективности проведенной терапии считается снижение титра в 4 и более раз в течение 1 года.

Прием по предварительной записи! Суббота, воскресенье.

Диагностика сифилиса по сей день считается достаточно сложной процедурой, не всегда гарантирующей быстрые и правильные результаты. Как провериться на сифилис и верно определить результаты всех проведенных исследований?

Что такое лабораторное подтверждение указанного диагноза, каким образом оно производится? Как диагностировать вторичный сифилис или латентную стадию заболевания? Рассмотрим эти вопросы в данной статье.

Методы диагностики

Сбор анамнеза

Прежде всего, при наличии подозрений на сифилис следует немедленно отправиться на консультацию к венерологу. Уже на стадии консультирования и осмотра врач может выставить предварительный анализ.

Для диагностики венерологу нужно собрать анамнез, т.е. всю необходимую информацию: об особенностях половой жизни пациента, наличии у него контактов с возможными сифилитиками, жалобах, были ли раньше венерические заболевания и пр.

Получив эту информацию, венеролог концентрируется на решении вопроса, какому заболеванию свойственна выявленная в ходе сбора анамнеза симптоматика. Далее с целью проверки на недуг проводится клинический осмотр пациента.

Осмотр больного

Наибольшее внимание врач уделяет осмотру и изучению кожи и слизистых оболочек половых органов, заднего прохода, а также слизистых полости рта. Тщательно ощупываются лимфатические узлы, выявляются очаги их некроза.

На этом этапе обследования можно с высокой точности распознать недуг, т.е. выставить первичный диагноз. Но чтобы удостовериться в этом на 100%, необходим целый ряд лабораторных исследований с положительными данными.

Этот вид диагностики делится на два отдельных исследования. В первом случае можно выявить возбудителя этого сложного заболевания, во втором – определить степень изменения иммунитета больного.

Микроскопия

Выявление бледной трепонемы осуществляется с помощью известной медицинской технологии под названием темнопольная микроскопия бактерий. Науке известно, что бледная трепонема плохо окрашивается традиционными красителями.

Поэтому на темном поле специального микроскопа она немедленно становится видна в виде небольшой спирали. При этом исследуется материал, взятый из язвочки, похожей на сифилитическую, являющейся результатом первичной инфекции.

Реакция флюоресценции

В этом случае биологический материал обрабатывается специальной сывороткой, в результате действия которой бледная трепонема начинает светиться, выглядит очень красиво и нарядно.

Полимеразная реакция

С помощью этой реакции врач обнаружит ДНК бледной трепонемы, т.е. посредством ПЦР можно окончательно доказать наличие в организме больного данного инфекционного агента.

Как диагностировать это заболевание по иммунологическим показателям? Их исследование в медицине именуется серологией. Серодиагностика обладает множеством современных методов, они широко применяются на практике.

Все эти методы основаны на исследовании крови пациента. Одна группа методов направлена на выделение в крови антител против бледной трепонемы, Вторая группа изучает изменения в иммунитете в связи с деятельностью этой вредоносной бактерии.

1) Микроскопическая реакция преципитации.

В ходе этого исследования в крови больного выявляются и проверяются антитела, которые были выработаны его иммунной системой против клеток организма, поврежденных в результате деятельности бледной трепонемы.

Этот вид тестирования имеет высокую достоверность, но может выявить не только сифилис, но и иные заболевания (например, гонорею, её возбудителями являются гонококки). Поэтому с помощью теста появляется только подозрение на инфекцию.

Преципитацию часто используют не для диагностики, но и изучения эффективности терапии. Если пациент благополучно излечился, то указанная выше реакция становится отрицательной.

Этим этот вид лабораторного исследования существенно отличается от других вариантов серологических исследований, которые после излечения долго могут давать положительную реакцию, фиксировать наличие болезни в организме человека.

2) Реакция Вассермана.

В результате такого тестирования ставятся «плюсы». Чем больше «плюсов», тем достоверней наличие бледной трепонемы в организме человека. Максимальный положительный результат – четыре «плюса» или «++++».

Что такое трепонемная серология?

1) Реакция иммунологической флюоресценции.

В ходе данного тестирования обнаруживаются антитела, которые вырабатывает иммунитет человека, зараженного трепонемой. В ходе исследования сыворотка крови человека взаимодействует с препаратом, имеющим в своем составе антитела.

После смешивания обоих компонентов: сыворотки и антител, помеченных специальным светящимся веществом, они связываются друг с другом, после чего исследуются посредством специального микроскопа.

2) Иммуноферментный анализ.

С помощью этого анализа эффективно выявляется большинство инфекционных болезней. В ходе него происходит реакция антигена с антителами самого различного класса. При этом легко определить их количество.

По типу антител и их количеству можно сделать выводы по поводу диагноза, длительности течения выявленного заболевания, развитию патологического процесса, активности трепонемы, силе иммунной системы больного.

Благодаря обилию показателей зарождения, развития и течения болезни, этот анализ просто не заменим при диагностике множества инфекционных болезней. А также в качестве контроля их развития и излечения.

3) Реакция гемагглютинации.

В результате этого теста склеиваются эритроциты. Суть ее в том, что после предварительной подготовки на поверхности эритроцитов, фиксируются белки трепонемы.

Эти материалы перемешиваются с сывороткой крови, в которой имеются антитела к этой вредоносной бактерии. После склеивания эритроцитов исследуемая кровь становится густой и зернистой.

Интересно, что даже после полного излечения от недуга описанная выше реакция может давать положительный результат и сбивать врачей, занимающихся диагностикой иных инфекционных болезней.

Изменения в иммунной системе сифилитика

Итак, диагностика недуга и контроль его эффективного излечения – сложная профессиональная задача. А больному без серьезного образования в области медицины разобраться в хитросплетениях анализов и реакций попросту невозможно.

Попробуем просто и доступно объяснить развитие изменений в иммунной системе больного, и по каким лабораторным показателям это можно быстро выявить, чтобы своевременно поставить правильный диагноз.

Сразу после попадания инфекции (бледной трепонемы) в организм человека она сталкивается с иммунными клетками. Они немедленно идентифицируют ее, как чужеродный и опасный микроорганизм, и начинают действовать.

В крови больного, спустя неделю или месяц, появляются антитела, оказывающие специфическое воздействие на бактерии бледной трепонемы. Их можно разделить на два класса антител.

Первые свидетельствуют, что инфицирование произошло совсем недавно (неделю назад). Вторые говорят о том, что организм уже среагировал должным образом и сформировал собственную защиту, устойчивый иммунитет от болезни.

Перед появлением клинических симптомов этой болезни в крови больного выявляются специфические антитела. В ходе лечения количество антител существенно снижается и постепенно нормализуется. Формируется стойкий иммунитет к трепонеме в будущем.

Как интерпретировать результаты серологии?

Сегодня большинство венерологов в своей профессиональной практике, чтобы диагностировать сифилис чаще всего используются три реакции:

1) преципитации;

2) флюоресценции;

3) гемагглютинации.

Если все три исследования дали отрицательный результат, значит, инфицирование отсутствует, либо диагностика проведена ранее определенного срока. Делать это нужно через семь дней после заражения.

Если все три исследования дали положительный результат, значит, наличие недуга в организме пациента подтверждено, и следует немедленно начать его интенсивное лечение, чтобы болезнь не переросла в хроническую форму.

Если отрицательные показатели выдала только реакция преципитации, значит, у пациента поздняя стадия лечения болезни, или терапия уже завершена. Положительный результат свидетельствует о наличии антител в крови.

Если отрицательные данные только у реакции флюоресценции, следует пройти все исследования вновь, т.к. велика вероятность, что они проведены неправильно и дают ложные показатели.

Если положительные показатели дала только гемагглютинация, значит, она либо ложная (проведена с нарушением установленных правил), либо проведена после окончания терапии заболевания.

Если положительные показатели дала только реакция флюоресценции, это либо ранняя стадия недуга, либо проведена после эффективной терапии. Если положительную реакцию дала только преципитация, то результат исследований – ложен.

Следовательно, для качественной диагностики этого сложного инфекционного заболевания только серологии недостаточно. Для постановки правильного и окончательного диагноза обязателен весь комплекс клинических исследований и дифференциальная диагностика.

Среди венерических заболеваний занимает первые позиции по распространенности. Заболевание передается от больного к здоровому преимущественно половым путем. Диагностика сифилиса – сложный, поэтапный процесс, который не всегда приносит результат.

Подозрение на сифилис – к какому врачу идти?

Большое распространение заболевание получило потому, что многие молодые люди просто не знают, как определить сифилис, какие обследования необходимо пройти. Лечением половых инфекций занимаются врачи венерологи или дерматовенерологи, так как в большинстве случаев подобные инфекции сопровождаются повреждением кожных покровов. Медики советуют с профилактической целью обследоваться каждому пациенту репродуктивного возраста. Болезнь часто протекает в скрытой форме, поэтому выявить ее можно не всегда.

Методы диагностики сифилиса

Диагностические мероприятия по выявлению заболевания основываются на клинических и лабораторных данных. Диагноз «сифилис» ставится только после получения положительных результатов лабораторного исследования. Ранняя диагностика сифилиса исключает прогрессирование заболевания. Первичный сифилис определяется исследованием отделяемого твердого шанкра эрозивных папул. Среди основных методов лабораторной диагностики сифилиса необходимо выделить:

1. Бактериоскопию.
2. Серологическое исследование (специфическое и неспецифическое).
3. Гистологию (при ).
4. Микроскопию (исследование нативного препарата, отделяемого эрозивных или язвенных высыпаний, пунктата из лимфоузла).

Микробиологическая диагностика сифилиса

Основу данного типа обследования составляет бактериоскопический метод диагностики сифилиса. Он предполагает обнаружение T.pallidum в материале, забранном из очагов воспаления:

• твердый шанкр;
• эрозивные нарушения;
• лимфоузлы;
• спинной мозг.

Предварительно врач протирает место забора материала тампоном с физраствором, затем раздражает поверхность эрозии специальной петлей, пока из нее не покажется тканевая жидкость.

При этом избегают смешивания материала с кровью. Жидкость помещается на предметное стекло. Препарат, полученный таким способом, исследуется с помощью микроскопа. Методы микробиологической диагностики сифилиса основываются на обнаружении возбудителя в материале. При отрицательном результате исследование проводят несколько дней подряд для полного исключения болезни.

Серологическая диагностика сифилиса

Для выявления и подтверждения диагноза «сифилис» в случае поздних и скрытых форм болезней основы диагностики составляет серологический метод. В большинстве случаев для диагностики сифилиса используют . Метод предполагает исследование венозной крови пациентов, которые обнаруживают антитела к антигенам возбудителя. Такой анализ на бледную трепонему помогает выявить заболевание даже при отсутствии явных клинических симптомов.

В зависимости от состава используемых для диагностики веществ, серологические методы подразделяют на:

1. Специфические (трепонемные).
2. Неспецифические (нетрепонемные).

Трепонемные тесты

Трепонемные тесты – это метод диагностики, использующий в качестве основы специфические антигены Treponemapallidum. Метод используется как для постановки, так и для подтверждения диагноза, для дифференциальной диагностики сифилиса. Все специфические тесты имеют высокую чувствительность и точные результаты. Механизмы проведения специфических тестов неодинаковы, поэтому они имеют различные показания к применению. К трепонемным тестам относят следующие методы лабораторной диагностики сифилиса:

1. Реакцию связывания комплемента (реакция Вассермана, РВ) с трепонемным антигеном – РСКт.
2. Реакцию иммобилизации бледных трепонем – РИБТ.
3. Реакцию иммунофлюоресценции – РИФ. Применяется в нескольких модификациях: РИФ-200 (FTA-200); РИФ-абс; РИФц – реакция иммунофлюоресценции с цельной кровью или спинномозговой жидкостью.
4. Реакцию пассивной гемагглютинации – РПГА.
5. – ИФА.
6. Иммуноблотинг.

Нетрепонемные тесты

Нетрепонемные тесты на сифилис используются в качестве отборочных и не подходят для окончательной диагностики, выставления диагноза. Они активно применяются для обследования больших групп населения с целью профилактических осмотров при возникновении неблагоприятной эпидемиологической ситуации. Тест обладает простотой проведения, имеет высокую чувствительность. Результат диагностики оценивается врачом. Чувствительность неспецифических тестов при ранних формах заболевания составляет около 70 %, а при вторичном сифилисе – 100 %.

К нетрепонемным тестам диагностики сифилиса относятся:

1. RPR (RapidPlasmaReagins).
2. Тест с инактивированной сывороткой – МРП (микрореакция преципитации с кардиолипиновым антигеном).

Данные флокуляционные тесты характеризуются простотой оценки. В ходе реакции образуется комплекс «антиген + антитело», который формирует хлопья, различимые с помощью увеличительного стекла. Роль антигена в тесте выполняет кардиолипиновый антиген, который получают из сердечной мышцы быка. Связь с антигенами возбудителя сифилиса при этом отсутствует, поэтому тесты и получили название нетрепонемные.

Экспресс-диагностика сифилиса

Современные методы диагностики сифилиса предполагают выявление заболевания на ранних стадиях. В качестве метода экспресс-диагностики используется RapidPlasmaReagin(RPR). Тест направлен на определение концентрации в крови антител к возбудителю сифилиса. При заражении бледная трепонема в организме формирует защитные антитела IgG и IgM. Наличие их в образце забранной крови является косвенным доказательством присутствия в организме бледной трепонемы. Данная диагностика сифилиса помогает установить точный срок продолжительности заболевания, время инфицирования.

Анализы на сифилис – расшифровка

Современная лабораторная диагностика сифилиса основывается следующих методах:

• нетрепонемный тест – RPR или VDRL;
• трепонемные тесты – РИФ и РПГА.

В странах СНГ для диагностики сифилиса чаще применяют реакцию Вассермана, также реакцию иммобилизации бледных трепонем – РИБТ. Оценку полученных результатов производит только врач, который учитывает клинические проявления заболевания, стадию патологии, состояние пациента. С примерными результатами исследований можно ознакомиться в таблице ниже.ото

Дифференциальная диагностика сифилиса

Когда у врача после первичного осмотра возникает подозрение на сифилис, он направляет пациента для сдачи крови на RV. Если результаты исследования подтвердили наличие бледной трепонемы в организме, проводится дифференциальная диагностика с определением стадии заболевания. При первичном сифилисе чаще бывают положительными РИФ и ИФА, однако это не позволяет выставить диагноз «сифилис».

Диагностика вторичного сифилиса не вызывает затруднений – резким положительным является результат по всем серологическим реакциям. РИБТ положительна больше чем у 50 % больных. Третичная форма сифилиса практически не вызывает затруднений. Серологические реакции положительные в 50–90 % случаев. Диагностика скрытого серопозитивного сифилиса основывается на серологических реакциях с подтверждением результата с помощью РИБТ.